超微量分光光度计之所以能检测微量样品的原液无需稀释,是因为可以通过调节液滴的光程,从而进行了“光程稀释”的作用。光程越小,可检测的样品浓度越高(需一定限制内,处于朗伯-比尔定律线性范围内)。这一过程可通过液柱、液膜等形式实现,设备具有一个关键部件即-光程调节器。
光程调节器对应检测方法为样品拉伸法(液柱法)。通常可切换2-5个光程,通过下部元件一定的机械结构运动,如转动,使上部元件进行高低切换,使液柱的高度改变,调节光程。此结构是否需要校准/调整,取决于下部元件的设计,如为马达等部件,则需要校准。值得注意的是,此类切换器的上部原件暴露在外,需要注意清洁,避免灰尘及纸屑落入夹缝,否则将导致光程的较大偏差。
超微量分光光度计与传统分光光度计相比,其所需样品体积小,仅需0.5-2μl;无需比色皿,用移液枪直接将样品滴加到检测平台上,测量时样品自动形成液柱,检测完成后只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可,避免了因为比色皿清洗不净带来的交叉污染。
超微量分光光度计一般具有多个光程(电机控制自动选择),而传统分光光度计的光程为10 mm,超微量分光光度计样品无需稀释,测量范围可达到常规分光光度计的50倍。